甜蜜素是甜味剂，允许在饮料、冰淇淋、糕点、蜜饯中使用。检测一般用气相色谱法、比色法等。M(C6H12NNNaO3S)=2022。
酸性介质中，环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应，生成环己醇亚硝酸脂，利用气相色谱法定量。
1．仪器
气相色谱仪(GC仪)，附氢火焰离子化检测器。
2．仪器工作条件
①不锈钢色谱柱(M型)：2m×3mm，内填l0％SE-30的ChromosorbWAWDMCS(80～100目)。
②柱温80℃，汽化室，检测器温度150℃。
③流速，N240mL／min，H230mL／min，空气300mL／min。
3．试剂
①正己烷。
②氯化钠。
③层析用硅胶。
④50g·L1亚硝酸钠溶液。
⑤10％硫酸溶液。
⑥甜蜜素标准贮存液(10mg·mL-1)：称取环己基氨基磺酸钠标准品1．0000g，用水溶解，并定溶至100mL。
4．标准曲线制备
吸取甜蜜素标准贮存液(10mg·mL-1)于100mL容量瓶中，加水20mL，置冰浴中加50g·L-1的亚硝酸钠溶液5mL，10％的硫酸溶液5mL，混匀，冰浴中放置30min，不断摇动，加l0mL正己烷、5g氯化钠，振摇80次，静置，分层。吸取正己烷层10mL于具塞离心管中，离心分离，分别取提取液1～5µL，分别注人GC中，绘制标准曲线。
5．测定
样品经处理后，准确称取已剪碎的固体样品2g于研钵中，加少量硅胶研磨呈干粉状，用水溶解，定量转移至100mL容量瓶中，用水洗研钵，并人容量瓶，定溶至刻度，摇匀，1h后过滤。准确吸取溶液20mL于100mL具塞比色管中，置冰浴中加5g／L的亚硝酸钠5mL，l0％的硫酸5mL，混匀，冰浴中30min，不断摇动，加正己烷l0mL，氯化钠5g，振摇80次，静置分层。取正己烷层液10mL于具塞离心管中，离心分离，上层清液待测。取提取液l～5µL分别注入Gc仪，测得响应值，从标准曲线上查出相应含量。若为液体样品，则摇匀后直接准确称取20g(含二氧化碳的样品应加热除去，含酒精的样品用40g·L-1的氢氧化钠调至碱性，于沸水中加热除去后再称取)于100mL具塞比色管中，置冰浴中加5g·L-1的亚硝酸钠5mL，10％的硫酸5mL，混匀，冰浴中30min，不断摇动，加正己烷10mL，氯化钠5g，振摇80次，静置分层。取正己烷层液10mL于具塞离心管中，离心分离，上层清液待测。取提取液1～5µL分别注入GC仪。测得响应值，从标准曲线上查出相应含量。
注：可用超声提取法。操作如下：准确称取剪碎并混合均匀的样品2g，置于150mL锥形瓶中，加入80mL水，浸渍提取2h，于超声波清洗器中超声振荡30min，过滤于100n也容量瓶中，残渣用20mL水分数次洗涤，洗液合并滤于容量瓶中，加水至刻度，即得试样溶液。准确吸取试样溶液20．00mL于1．0mL比色管中，置于冰浴中，加入5mL50g·L-1亚硝酸钠溶液，5mL10％的硫酸溶液，摇匀，在冰浴中放置30min。不断加正己烷10mL，氯化钠5g，振摇80次，静置分层。取正己烷层液10n止于具塞离心管中，离心分离，E层清液待测。
6．计算
食品中甜蜜素的含量(g．kg-1)=(m1*1000)/m*(V2/V1)*1000
式中：m1一一从标准曲线上查得的甜蜜素含量，mg；
m——称取样品的总质量，g；
V2——进样体积，mL；
V1——样品液的总体积，mL。
7．说明
该方法多用于饮料、蜜饯、凉果等样品中甜蜜素的检测。
