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羧甲基纤维素钠测定

  • 发布日期:2016/9/24 13:03:24 阅读次数:1446
  • 化学名:羧甲基纤维素钠。

    (一)定性

    1.试剂和溶液

    ①盐酸。

    ②硫酸铜1%溶液。

    2.试验溶液的制备

    取2g试样,置于100mL温热水中,搅拌均匀,继续搅拌至胶冷,冷却至室温。

    3.操作步骤

    ①取试验溶液30mL,加入3mL盐酸,产生白色沉淀。

    ②取试验溶液50mL,加入10mLl%硫酸铜溶液,产生绒毛状蓝色沉淀。

    ③用盐酸湿润铂丝,先在无色火焰上灼烧至无色,再蘸取试液少许,在无色火焰中燃烧,火焰即呈鲜黄色(钠离子反应)。

    (二)定量

    1.原理

    食品中的羧甲基纤维素钠,用萘二酚比色法测定羧甲基纤维素钠。

    2.仪器

    分光光度计。

    3.试剂和溶液

    ①酶溶液:准确称取500mg蛋白酶,加水溶解至10mL。

    ②四氢呋喃。

    ③萘二酚溶液:称取0.1g2,7一萘二酚,加100mL硫酸溶解,在水浴中加热至溶液成微黄色,冷后于暗处保存。此时黄色完全消失,临用时用硫酸稀释10倍。

    ④蛋白酶。

    4.样品溶液的制备

    准确称取样品约10g放入50mL具塞离心管中,在沸水浴中用玻璃棒搅拌,加热5min,冷却至50℃以下后加入40mL四氢呋喃,剧烈振荡,离心分离(5min,2000r/min),弃去上清液,残渣中的四氢呋喃吹氮气加温,尽可能将其除尽。再加10mL水,离心管放人60℃的超声波发生器中,用玻璃棒搅拌、浸渍,使残渣完全溶解或分散。加1mL酶溶液,振摇,在约37℃恒温箱中放置2~3h,再于水浴中加热10min后冷却,用水定量地转移到纤维透析袋内,浸于1000mL水中,15~25℃透析12~16h。将透析内液用水定量地移人150mL离心管中,加4倍量四氢呋喃振摇,离心分离(5min,2000r/min),弃去上清液,残留物加20mL2mol/LNaOH,在沸水浴中加热至完全溶解,加水成200mL,此液作为样品溶液。

    5.标准液的制备

    准确称取100g羧甲基纤维素钠,加水溶解成100mL,作为标准液(1mL溶液含羧甲基纤维素钠1mg),吸取此液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL,分别加水20mL,作为标准曲线用标准液(1mL溶液分别相当于羧甲基纤维素钠50fig、100µg、150µg、200µg、250µg)。

    6.测定步骤

    准确吸取样品溶液1mL,于比色管中,加20mL萘二酚溶液,在水浴中加热3h后冷却。将此液转入50mL容量瓶中,用50%硫酸洗比色管,合并洗液于容量瓶中,冷却,用50%硫酸稀至刻度。此液以50X硫酸作为参比,在波长540nm处测定吸光度。

    7.标准曲线

    分别取标准液各1mL,于比色管中,加20mL萘二酚溶液,在水浴中加热3h后冷却。将此液转人50mL容量瓶中,用50%硫酸洗比色管,合并洗液于容量瓶中,冷却,用50%硫酸释至刻度。此液以50%硫酸作为参比,在波长540nm处测定吸光度。绘制标准曲线。

    8.计算

    测得样品溶液的吸光度,从标准曲线上求出样品溶液中的羧甲基纤维钠的浓度(ug/mL-1),计算出样品中的羧甲基纤维素钠含量。

    X=C*稀释倍数/m

    式中:X——样品中的羧甲基纤维素钠含量,µg·g-1;

    C——样品溶液中的羧甲基纤维素钠浓度,µg·mL-1;

    m——样品质量,g。

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